扩展青霉碱性脂肪酶结构基因的克隆与原核表达

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【获取途径】超星期刊网
【作者】卜秀娟，孟宪梅，柳增善，代平
【作者单位】吉林大学军需科技学院；吉林工商学院生物工程分院；吉林大学人兽共患病教育部重点实验室；长春长生基因药业股份有限公司
【年份】2010
【卷号】第23卷
【期号】第5期
【页码】485-488
【ISSN】1004-5503
【关键词】扩展青霉碱性脂肪酶结构基因原核表达
【摘要】目的克隆并原核表达扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)结构基因。方法提取扩展青霉总RNA,经RT-PCR扩增PEL结构基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达质粒pET-28a-PEL,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白的表达形式及表达量,包涵体蛋白经变性、复性后,采用NaOH滴定法测定其酶活性。结果经RT-PCR扩增获得约780bp的PEL结构基因;所构建的重组表达质粒pET-28a-PEL经酶切及PCR鉴定正确;目的蛋白的相对分子质量约...
【基金】吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目
【文献类型】期刊