重组胶原蛋白多肽在大肠杆菌中的表达优化

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【作者】吴铭，郭立泉，陈光
【作者单位】吉林工商学院粮油食品深加工吉林省重点实验室；东北师范大学生命科学学院；吉林农业大学生命科学学院
【年份】2014
【卷号】第53卷
【期号】第10期
【页码】2443-2447
【ISSN】0439-8114
【关键词】胶原蛋白多肽大肠杆菌表达优化
【摘要】以Ⅵ型人胶原蛋白A2链基因为模板,PCR扩增得到目的基因CP6,构建了重组胶原蛋白表达载体,然后筛选高效表达的宿主菌,检测重组质粒的不稳定性以及对重组菌培养条件进行优化。结果表明,重组胶原蛋白在Rosetta(DE3)中表达量相对最高,重组质粒稳定性也较高。较佳的表达条件为接种量4%或5%,37℃、200 r/min培养至OD600 nm为0.7时,加入0.5 mol/L IPTG,培养5 h,并且纯化的重组蛋白与小鼠抗人COL6A2的单克隆抗体有特异性反应。
【基金】吉林省教育厅项目
【文献类型】期刊